VIII. Biológiai Tudományok Osztálya

Az egyedi sejtek adhéziójának populációs eloszlása a sejtciklus során nagy áteresztőképességű FluidFM technikával

Nanobioszenzorika Laboratórium
("Lendület" Kutatócsoport)
2022. május 11.


Az egyedi sejtek adhéziója alapvető szerepet játszik a biológiai és orvosbiológiai tudományokban, de pontos mérése nagyszámú sejt esetében továbbra is kihívást jelent. Jelenleg a tipikus erőmérési technikák általában alacsony áteresztőképességet, napi néhány sejtet kínálnak, ezért nem képesek feltárni a populáció szintjén megjelenő jelenségeket. Ebben a munkában (Ágoston G. Nagy, Nicolett Kanyó, Alexandra Vörös, Inna Székács, Attila Bonyár, Robert Horvath. Population distributions of single-cell adhesion parameters during the cell cycle from high-throughput robotic fluidic force microscopy. Scientific Reports, 2022) robotizált fluidikus erőmikroszkópiát (FluidFM) használtunk a sejtek adhéziós paramétereinek nagy áteresztőképességű mérésére, hogy mélyrehatóan tanulmányozhassuk a populáció eloszlását. A vizsgált sejttípus a genetikailag módosított HeLa Fucci volt, amely sejtciklus-függő fluoreszcens fehérjék expresszióját tartalmazza. Ez a tulajdonság a nagy áteresztőképességű méréssel kombinálva először tette lehetővé az egyedi sejtek adhéziós eloszlásának jellemzését a sejtciklus különböző szakaszaiban. Azt találtuk, hogy az olyan paraméterek, mint az egyedi sejt-adhéziós erő és az energia lognormális populációeloszlást követnek. A sejtterület szignifikánsan a legkisebb, a terület normalizált maximális adhéziós erője pedig szignifikánsan a legnagyobb a színtelen sejtek esetében (a mitotikus (M) és a korai G1 fázis). Egy új paraméter, a sejt rugós együtthatója, a maximális tapadási erő és a mechanikai leválás során elért maximális sejtnyúlás hányadosaként került bevezetésre, amely a színtelen sejtek esetében szignifikánsan a legnagyobb. Az M fázisban lévő sejtek atipikus módon tapadnak meg, úgynevezett retikuláris adhéziókkal, amelyek különböznek a kanonikus fokális adhézióktól.

A mérési összeállítás és eljárás sematikus ábrázolása. A FluidFM-en (A) az élő sejtek figyelhetők meg optikai mikroszkóppal (a B részábrán a konzol jól látható). A mérőfej alatt több sejt célzása valósítható meg. A sejteket az üreges FluidFM konzollal közelítik meg, amely a célsejttel való érintkezéskor szünetel, és szívással (vákuummal) rögzítik a sejtet a nyíláshoz, majd a konzolt visszahúzzák a hordozóról (C). A mérési folyamat a karakterisztikus FD görbéket adja, amelyek az Fmax, Emax és Dmax (D) elsődleges paramétereket mutatják be.